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Leica Microsystems Heidelberg GmbH
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Selección del distribuidor de haz de excitación
El distribuidor de haz de excitación dirige la luz de excitación del láser sobre el preparado y separa
éste de la fluorescencia de vuelta y la luz de excitación reflejada.
Si el sistema confocal está provisto de un distribuidor de haz acústico-óptico AOBS (Acousto-Optical
Beam Splitter), éste se ajusta automáticamente en la selección de una o varias líneas de láser de
forma que transmita la máxima fluorescencia y reduzca al mínimo la luz reflejada.
& vea Ajuste del distribuidor de haz acústico-óptico (AOBS) (página 139)
Si el sistema confocal dispone de un distribuidor de haz de excitación convencional, debe
seleccionarse un filtro apropiado para cada aplicación. A la izquierda del espectro se encuentra el
símbolo (línea inclinada verde) del distribuidor de haz de excitación. Haga clic en el símbolo y
seleccione el distribuidor de haz deseado:
K
Los filtros neutrales, como por ejemplo el filtro RT 30/70, se utilizan en las aplicaciones de
reflexión para dirigir la luz de excitación sobre la muestra y la luz reflejada al orificio de
detección.
K
Los filtros dicroicos, por ejemplo el filtro de paso corto de reflexión RSP 510, se utilizan en
aplicaciones de fluorescencia, para detectar la fluorescencia de una determinada gama de
longitud de onda y separarla de la luz de excitación.
K
Los filtros dicroicos dobles se utilizan para las capturas de imagen en las cuales el preparado se
marca con dos tinturas fluorescentes y se excita con dos longitudes de onda de excitación. Con
el filtro dicroico doble DD 488/ 568, por ejemplo, se separa la luz de excitación con una longitud
de onda de 488 nm y de 568 nm de la luz de detección. Según la configuración del sistema,
puede seleccionarse un filtro dicroico doble de los tipos DD 488/ 543 y DD 458/ 514.
K
Los filtros dicroicos triples se utilizan para las capturas de imagen en las cuales el preparado se
marca con tres tinturas fluorescentes y se excita con tres longitudes de onda de excitación. Con
el filtro dicroico triple TD 488/ 568/ 633, por ejemplo, se separa la luz de excitación con una
longitud de onda de 488 nm, 568n m y de 633 nm de la luz de detección. Según la configuración
del sistema, puede seleccionarse un filtro dicroico triple de los tipos TD 488/ 568/ 647 y TD 488/
543/ 633.
Ajuste de detectores y tablas de asignación de colores (LUT)
En el cuadro de diálogo, por debajo del espectro, se encuentran los campos de los cuatro detectores
PMT 1 hasta 4 así como el detector de subiluminación PMT Trans. Realice los ajustes siguientes:
K
Para activar los detectores deseados, haga clic en la casilla de verificación Active situada
debajo del símbolo de cada tabla de asignación de colores. Una sombra cúbica conecta el
detector activado con la corredera correspondiente de la escala del espectro.
K
Para definir la gama de longitud de onda en la que debe detectarse, desplace ambos extremos
de la corredera hasta la posición deseada de la escala, o bien,
K
Haga doble clic en la corredera. Se abre otro cuadro de diálogo en el que puede introducirse el
valor exacto para los puntos inicial y final de la gama de longitud de onda.
K
Para aplicaciones de fluorescencia se definen campos de lista con las tinturas fluorescentes
más frecuentes para cada detector. Seleccione la tintura fluorescente deseada para incluir su
curva de emisión en el espectro.
K
Para seleccionar la tabla de asignación de colores, haga clic en el símbolo correspondiente.
& vea Selección de tablas de asignación de colores (página 194)
Manual del usuario de Leica TCS SP2 español
Art. n.º: 159330056 / Vers.: 31102002
Se carga la configuración.
Permite cambiar el nombre de la configuración.
Se borra la configuración.
Funciones del software LCS:
Descripción de cada función
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