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Introducción a la cromatografía líquida de rendimiento ultraalto
Teoría del uso de partículas pequeñas en la cromatografía líquida
Teoría del uso de partículas pequeñas en la cromatografía líquida
Introducción
En 2003, Agilent presentó las primeras columnas de silicio poroso disponibles
comercializadas con partículas de 1,8 µm. Estas columnas fueron las primeras
de una clase conocida como columnas "inferiores a 2 µm" o STM. Estos mate-
riales de relleno se introdujeron en las columnas ZORBAX de Resolución Rápi-
da y Alto Rendimiento capaces de soportar 600 bar de presión para su uso con
el sistema LC de Resolución Rápida Agilent Serie 1200, presentado en 2006.
En 2009, se amplió el rango para incluir columnas de Resolución Rápida y Alta
Definición capaces de soportar usos rutinarios con 1200 bar de presión con el
fin de admitir la introducción del sistema LC Agilent 1290 Infinity con su
amplio rango operativo de hasta 1200 bar de presión y una velocidad de flujo
de 5 ml/min.
Estas columnas de tamaño de partícula inferior a 2 µm (1,8 µm) se pueden uti-
lizar para alcanzar dos objetivos principales:
1 Una cromatografía más rápida
2 Una resolución más elevada
La presión necesaria para conducir el disolvente por una columna que con-
tenga partículas STM aumenta rápidamente a medida que la velocidad del
flujo se eleva para realizar separaciones más rápidas, ya que la longitud de la
columna aumenta para obtener más resolución. Por tanto, la aceptación de las
columnas STM se ha producido al mismo tiempo que el desarrollo de los siste-
mas UHPLC (sistemas HPLC que ofrecen presiones superiores a la normativa
de 400 bar existente desde la aparición de la HPLC). Los sistemas LC de rendi-
miento ultraalto (o presión ultraalta) también ofrecen volúmenes de retardo
bajos y la recogida de datos rápida necesaria para picos estrechos de la croma-
tografía de alta resolución o rápida. El sistema LC Agilent 1290 Infinity es la
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Las columnas cortas con partículas inferiores a 2 µm ofrecen la oportuni-
dad de reducir drásticamente el tiempo de análisis mediante el aumento de
la velocidad del flujo sin perder la eficacia de separación.
Las columnas largas con partículas inferiores a 2 µm proporcionan una efi-
cacia superior y, por tanto, una mayor resolución, necesaria para realizar la
separación de muestras complejas. Una dispersión inferior también signi-
fica una menor dilución de los picos de analitos y las consiguientes ganan-
cias de sensibilidad, particularmente para LC/MS.
Manual y guía de referencia rápida del sistema LC Agilent 1290 Infinity
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