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Introducción a la cromatografía líquida de rendimiento ultraalto
Calentamiento derivado de la fricción
Calentamiento derivado de la fricción
Si se fuerza la fase móvil por la columna a una gran presión y a una velocidad
de flujo elevada, se genera calor. Los gradientes de temperatura resultantes
(radiales y longitudinales) pueden tener un impacto en la eficacia de la
columna.
donde F es la velocidad del flujo y p es la presión.
La termostatización potente de la columna (por ejemplo, mediante un baño de
agua) genera un gradiente de temperatura radial fuerte, lo que provoca una
pérdida significativa de la eficacia de la columna. La termostatización de la
columna de aire inmóvil reduce el gradiente de temperatura radial y, por
tanto, reduce la pérdida de eficacia. No obstante, se debe aceptar una tempe-
ratura de salida de la columna más elevada. La temperatura elevada puede
afectar a la selectividad. Con una retropresión inferior, se minimizan las pérdi-
das de rendimiento debido al calor por fricción, de forma que las columnas
inferiores a 2 µm con un diámetro interno de 4,6 o 3 mm ofrecen eficacias
superiores en comparación con las respectivas columnas de 2,1 mm de diáme-
tro interno.
Un ejemplo de una transferencia del método de gradiente a una columna STM
de 2,1 mm de diámetro interno en la que la separación se ha acelerado se
muestra en la
2,1 mm se llevó a cabo a una velocidad de flujo de 0,22 ml/min, lo que generó
380 bar de presión a una temperatura ajustada en 37 °C con todos los picos
separados en 12,5 min (no se muestra el cromatograma). El flujo se aumentó a
0,66 ml/min y los tiempos de gradiente se redujeron por un factor de tres, lo
que generó 1020 bar de presión con todos los picos eluidos en 4,2 min (parte
superior de la
ción, pero se puede observar una pérdida de resolución entre los picos 7 y 8 y
entre el pico 5 y el pico principal; esto se debe a que el calentamiento de la
columna cambia la selectividad de estos componentes. Se ha demostrado que
si se ejecuta el termostato de la columna a 5 °C menos, es suficiente para com-
pensar el efecto del calentamiento dentro de la columna y restablecer la sepa-
ración (parte inferior de la
hasta 1070 bar, lo que también indica que la temperatura interior de la
columna era inferior.
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Figura 9
en la página 19. El análisis inicial en la columna de
Figura 9
en la página 19). Esto debería ofrecer la misma separa-
Figura 9
Manual y guía de referencia rápida del sistema LC Agilent 1290 Infinity
en la página 19). La presión aumentó
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