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Problema
Gradiente de geles-capas desiguales
Problemas de electroforesis Run:
Curvas delanteras hasta Dye (sonríe) en los bordes Esto indica la corriente de fuga en los espaciadores. Asegúrese de limpiar
Curvas de los colorantes frontal hacia
abajo (frunce el ceño) en los bordes
Fuente de alimentación detecta fugas de corriente Agrietado o roto placa de alúmina en la base del tanque de separación.
Pobre drenaje del tanque
Tiempos inusualmente largo se ejecutan
Solución
Añadir sacarosa (15% de concentración final) o glicerol (25% de concen-
tración final) a la solución de monómero de alto por ciento.
Soluciones bombeado en demasiado rápido. Añadir una pequeña cantidad
de azul de bromofenol a la solución pesada para rastrear la formación del
gradiente. Deje de soluciones para subyacía, sin exceso de mezcla.
¡Atención! Las cantidades excesivas de azul de bromofenol inhibir
la polimerización.
los platos y en los bordes espaciadores, que las partes son libres de sucie-
dad o grasa, y que el gel está completamente polimerizados antes de sacarlo
de la máquina de colada.
Los geles se han ejecutado con lado de la bisagra hacia la parte superior del
tanque. La bisagra también sella el borde inferior del gel de fugas eléctri-
cas. Lo mejor es colocar el lado casetes bisagra hacia abajo para obtener las
rectas frentes de colorantes.
Búfer insuficiente en la parte superior. Asegúrese de que el buffer se llena
de manera ½ a través del espaciador de arriba a hacer que el campo eléc-
trico a través de la mayoría, incluso el gel y evitar que el gel se seque.
Demasiado tampón en la parte superior del gel. Asegúrese de que el tampón
se llena manera media a través del espaciador superior para hacer que el
campo eléctrico a través de más aún el gel y evitar la corriente de derivación
sobre el gel en la parte superior.
Compruebe recirculación de búfer está encendido y funcionando correctamente.
Utilizar un baño de agua refrigerada para mantener la temperatura dentro
del tanque tampón.
Disminuya el valor de corriente o voltaje.
Polimerización deficiente en los espaciadores. Asegúrese de limpiar los
platos y en los bordes espaciadores, que las partes son libres de suciedad o
grasa, y que el gel está completamente polimerizados antes de sacarlo de la
máquina de colada.
Póngase en contacto con Hoefer o con su distribuidor.
Accesorio de drenaje se ha convertido tapado con escombros. Suavemente a
ras del agua a través de la línea de drenaje.
Demasiado tampón en la parte superior del gel. Asegúrese de que el tampón
se llena manera media a través del espaciador superior para hacer que el
campo eléctrico a través de más aún el gel y evitar la corriente de derivación
sobre el gel en la parte superior.
Pobre calidad de los reactivos. Las soluciones de acrilamida puede acumu-
larse ácido acrílico con el tiempo. No guarde las soluciones madre de
acrilamida más de ~3 meses y acrilamida se almacena a 4 º C.
Tampón preparado incorrectamente. Utilice la forma básica de Tris. No
ajuste el pH del tampón después de la preparación.
Compruebe la configuración de energía y ajustar si es necesario.
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