• Ensuite doucement presser le bouton poussoir jusqu'∫
la premi¯re butée, ce qui provoque la distribution du
liquide (fig. 4C).
• Attendre une seconde et presser compl¯tement le bou-
ton poussoir jusqu'∫ la premi¯re butée afin d'expulser
la derni¯re fraction liquide (fig. 4D).
• Tout en maintenant le bouton poussoir compl¯tement
enfoncé, retirez la pipette en glissant le cône le long de
la paroi du tube récepteur.
• Relâcher compl¯tement le bouton poussoir (fig. 4E) et
éjecter le cône en pressant le bouton de commande de
l'éjecteur (fig. 4F).
ATTENTION: Si vous changez de liquide, n'oubliez pas
de remplacer le cône par un neuf.
4.3 PRE-RINCAGE DU CONE
Lors du pipetage de solutions dont la viscosité et la den-
sité sont différentes de celles de l'eau (telles que les
sérums ou les solvants organiques), une certaine réten-
tion de liquide peut s'observer sur la paroi interne du
cône. Ce film peut provoquer une erreur. Cependant,
une fois formé, il reste relativement constant d'un
pipetage ∫ l'autre avec le m˘me cône. L'erreur peut
donc ˘tre évitée en formant le film de la premi¯re manip-
ulation de l'échantillon. Dans ce but, il faut aspirer et
redistribuer le liquide dans le m˘me récipient. Une fois le
film en place dans le cône, les pipetages suivants auront
une meilleure exactitude et répétabilité.
4.4 ASPIRATION DES SOLUTIONS DENSES
Les erreurs d'exactitude et de répétabilité, indiquées au
Tableau 1, ont été obtenues avec de l'eau distillée. Lors
du pipetage des liquides dont les propriétés (densité,
viscosité, tension superficielle) sont différentes de celles
de l'eau, une compensation de réglage du volume peut
s'avérer nécessaire.
ATTENTION: Il est possible d'éviter les différences de
prél¯vement grâce ∫ un pipetage lent qui permet au liq-
uide aspiré de suivre les variations de la pression. Apr¯s
chaque aspiration et distribution, il faut attendre environ
2 secondes sans bouger la pipette.
Si cette méthode ne permet pas d'obtenir de résultats
précis, il faut procéder au recalibrage de la pipette, en
suivant les principes du chapitre 5.
53
Apr¯s le recalibrage, il est recommandé d'enregistrer le
recalibrage et la compensation appliquée, afin de faciliter
le recalibrage d'origine avec le liquide de référence.
5. RECALIBRAGE
Les pipettes DISCOVERY PRO sont calibrées par la
méthode gravimétrique avec l'utilisation des cônes HTL
et de l'eau distillée, ∫ une température de 20°±1°C, con-
formément ∫ la norme EN ISO 8655.
Il est recommandé de procéder ∫ une vérification péri-
odique du fonctionnement de la pipette. La durée de l'u-
tilisation de la pipette entre les vérifications dépend de la
charge (liquide) et d'autres conditions (intensité d'ex-
ploitation et de stérilisation dans un autoclave, remplace-
ment des pi¯ces détachées) dans lesquelles la pipette
est utilisée.
Si vous constatez, pendant l'utilisation de la pipette, que
l'erreur de précision (différence entre le volume réel
prélevé et le volume réglé) dépasse les valeurs admissi-
bles indiquées dans le Tableau 1, il faut procéder au
recalibrage de la pipette.
L'aspiration de la pipette est influencée par des facteurs
tels que les cônes utilisés, les propriétés du liquide
pipeté (densité, viscosité) ou les conditions du travail
(température ambiante, pression).
Vérification des param¯tres de la pipette
Afin de déterminer l'erreur de précision, il faut s'assurer
que les conditions ci-dessous sont réunies :
• La température ambiante, celle de la pipette, du cône
et du liquide de référence (en principe l'eau distillée)
doit ˘tre de 20 ∫ 25°C et elle doit ˘tre stabilisée pen-
dant le pesage avec une précision de ±0.5°C,
• La sensibilité de la balance doit ˘tre adaptée au vol-
ume ∫ vérifier (Tableau 3),
Volume [μl]
Sensibilité de la balance [mg]
Tableau 3
• Le tableau 4 présente les facteurs de conversion mg/μl
pour l'eau distillée ou un autre liquide ∫ densité com-
parable.
FRANÇAIS
0.1 - 10
10 - 100
> 100
0.001
0.01
0.1
54