Calibración De La Sonda De Od; Comprobaciones Anteriores A La Inoculación; Inoculación De Células - Thermo Fisher Scientific HyPerforma 2.1 Guía Para El Usuario

Capítulo 3 | Información sobre el funcionamiento
Thermo Scientific
3.6.10 Calibración de la sonda de OD
Tras una polarización de entre seis y ocho horas, la sonda de OD se
puede calibrar en el S.U.B. siguiendo protocolos estándares. Active
la aspersión de aire completa. No supere los caudales de gasificación
máximos indicados en las tablas 3.7 y 3.8 del apartado 3.6.8.
Realice la aspersión hasta que se estabilice la lectura de OD. Use el
valor estabilizado como valor de referencia de OD del 100 % para el
controlador. Establezca el valor de referencia de OD de cero por ciento.
Para ello, realice la aspersión con nitrógeno o desconecte la sonda de
OD momentáneamente.
3.6.11 Comprobaciones anteriores a la inoculación
Antes de la inoculación, compruebe lo siguiente:
9 Tras llenar el S.U.B. con medios (hasta un volumen del 50 %
o superior), las lengüetas del BPC se han desconectado del
hardware del S.U.B.
9 La sonda de pH se ha calibrado, esterilizado en autoclave
y conectado mediante un puerto de conector aséptico. Realice
1 punto de desviación en el controlador según sea necesario.
9 La sonda de OD se ha esterilizado en autoclave, se ha conectado
con un puerto de conector aséptico, se ha polarizado (entre seis
y ocho horas) y se ha calibrado.
9 El RTD/sensor de temperatura está completamente colocado y fijado
en el termopozo.
9 Asegúrese de que todos los sensores se encuentren por debajo del
nivel de líquido.
9 Los parámetros de funcionamiento (temperatura, agitación, pH y OD)
se encuentran en los valores de referencia deseados.
9 Se dispone de un método para realizar conexiones de
tubos asépticas.
3.6.12 Inoculación de células
Una vez que el S.U.B. funciona en el estado equilibrado estable
deseado y alcanza la temperatura adecuada, el S.U.B. está listo para
la inoculación. Conecte el conjunto de conductos de adición de inóculo
al frasco de cultivo sembrado (equipado con los conectores/tubos
adecuados) y transfiera el inóculo al S.U.B. Esto se suele realizar con el
proceso de conexión de tubos (conexión Luer Lock aséptica o soldadura
de tubos) y la bomba peristáltica. Bombee el volumen deseado de
células sembradas hacia el S.U.B.
Guía para el usuario del biorreactor desechable HyPerforma 2.1 | 136