BD CrystalSpec Guía Para La Utilizacion página 3

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Néphélomètre CrystalSpec
Guide de l'utilisateur
APPLICATION
Le néphélomètre CrystalSpec est un appareil portable fonctionnant sur pile conçu pour mesurer la turbidité
de suspensions microbiennes équivalentes aux solutions standard de McFarland 0,5 – 4,0 inclus.
L'instrument peut être utilisé pour toute procédure de laboratoire nécessitant un ajustement de la densité
d'un inoculum compris dans cet intervalle.
RESUME ET EXPLICATION
La comparaison visuelle des suspensions de microorganismes avec des normes de turbidité est une méth-
ode approuvée pour estimer les densités en microorganismes. La norme la plus généralement utilisée est
celle de McFarland. 1 Un étalon McFarland est préparé par l'addition de chlorure de baryum à une solution
aqueuse d'acide sulfurique. La densité du précipité de sulfate de baryum ainsi obtenu sert à évaluer le nom-
bre de colonies d'une suspension préparée ; par exemple McFarland 1 équivaut à environ 3 x 10
D'autres normes ont été utilisées pour mesurer la densité, à savoir le dioxyde de titane
de particules de latex. 3
La mesure par un instrument de turbidité se base sur l'aptitude des particules à disperser la lumière
lorsqu'elles sont en suspension. La mesure de cette dispersion de la lumière est appelée la néphélométrie.
Afin de pouvoir obtenir une mesure précise de la densité, il est nécessaire d'utiliser une méthode d'étalon-
nage fiable.
PRINCIPES DE LA METHODE
Le néphélomètre CrystalSpec mesure la dispersion de la lumière pour un angle d'incidence de 90 °. Il s'agit
d'un instrument qui utilise une diode électroluminescente comme source émettrice de lumière et une photo-
diode comme détecteur. Des suspensions bactériennes de concentrations connues (UFC/mL) ont été utilisées
pour développer l'instrument. Les comptages de colonies ont été corrélés avec les unités McFarland et l'in-
strument CrystalSpec a été programmé pour afficher les résultats des mesures en unités McFarland. Les
standards d'étalonnage fournis avec l'instrument ont été développés pour assurer un étalonnage correct.
Avant d'effectuer une mesure avec le néphélomètre CrystalSpec il faut étalonner l'instrument au moyen
des standards fournis. Pour déterminer la valeur McFarland d'une suspension microbienne, il faut placer un
tube dans la chambre de lecture et appuyer sur le bouton d'analyse. Les résultats sont indiqués en unités
McFarland sur l'affichage à cristaux liquides (LCD).
SPECIFICATIONS :
Intervalle.................... McFarland 0,5 – 4,0
Précision .................... ± 0,1 unité McFarland de L'appareil ............................................ 20 °C à 30 °C
Reproductibilité ........ ± 0,1 unité McFarland Intervalle de températures de stockage
Pile ............................ 9 V alcaline
Durée de vie de la pile 1 an (généralement)
Précautions : diagnostic in vitro
Lire toutes les instructions avant toute utilisation et les suivre précisément.
MODE OPERATOIRE
Matériel fourni : le néphélomètre CrystalSpec avec un blanc d'étalonnage CrystalSpec (B), un standard d'é-
talonnage CrystalSpec (S), un adaptateur pour échantillon de petit volume et une pile de 9 volts.
Matériel non-fourni : les milieux de culture et l'équipement d'appoint nécessaires pour préparer une sus-
pension bactérienne.
Instructions :
INSTALLATION ET REMPLACEMENT DE LA PILE – Déballer le néphélomètre CrystalSpec et la pile de 9 V.
Inverser l'instrument et retirer le couvercle du boîtier de la pile. Installer la pile et remettre le couvercle.
Lors du remplacement d'une pile déchargée, appuyer sur un des boutons (soit "Étalonnage", soit
"Analyse") pendant 3 secondes, après avoir retiré la pile.
Quand la pile est installée la première fois, un "T" apparaît sur la fenêtre d'affichage pendant la durée de
l'évaluation interne. Ce "T" apparaît aussi quand une pile usée est remplacée par une pile neuve.
Si, lors de l'installation d'une pile neuve, le contact est interrompu avant que la pince de la pile soit bien
en place, l'affichage "T" peut s'effacer. L'appareil devrait fonctionner correctement, mais s'il y a un doute,
réinstaller la pile selon les instructions ci-dessus.
L'instrument CrystalSpec dispose d'un indicateur lumineux interne de charge. En plus des affichages pour
échantillons, une valeur comprise entre "B0" et "B5" est affichée à l'extrême droite de la fenêtre pour
indiquer le niveau de charge de la pile. Une pile complètement chargée affiche "B5", tandis qu'une pile
nécessitant d'être changée affiche "B0".
Quand la charge de la pile est si faible que l'intégrité des lectures est compromise, un "X" est affiché et la
pile est complètement déchargée par l'instrument. Tant que la pile n'est pas remplacée, l'instrument ne
fonctionne pas.
NOTA : L'instrument doit être ré-étalonné chaque fois que la pile est changée ou débranchée de l'instru-
ment.
PROCEDURE D'ETALONNAGE – L'instrument CrystalSpec ne requiert aucune période de mise en route ; il est
prêt à être étalonné et employé immédiatement. Un blanc d'étalonnage CrystalSpec (B) et un standard d'é-
talonnage CrystalSpec (S) sont fournis avec l'instrument ; utiliser uniquement ces standards d'étalonnage
pour étalonner l'instrument. Un système de contrôle interne des erreurs est présent pour assurer un étalon-
nage correct de l'instrument.
Le néphélomètre dispose de fonctions internes qui minimisent le besoin d'étalonnages fréquents. Un
étalonnage ne sera nécessaire que dans les cas suivants : (a) à chaque fois que la pile est remplacée ou
débranchée, (b) si le message d'erreur "E" est affiché lors d'une mesure et (c) à chaque fois que la mesure
journalière du standard d'étalonnage (S) est autre que 1,9, 2,0 ou 2,1.
Se référer Procedure D'etalonnage, Tableau 2, page 10
1. Si le volume de l'échantillon à mesurer est compris entre 2,0 et 4,0 mL, introduire l'adaptateur pour
échantillon de petit volume avant étalonnage. Si le volume est supérieur à 4,0 mL, l'adaptateur pour
échantillon de petit volume n'est pas nécessaire.
2. Pour faciliter l'étalonnage, appuyer sur le bouton d'étalonnage avec un doigt de la main gauche et
appuyer sur le bouton d'analyse avec un doigt de la main droite.
3. La séquence consistant à appuyer et relâcher le bouton est importante pour un étalonnage approprié
et un fonctionnement précis du CrystalSpec.
4. Si , pendant l'étalonnage, les affichages n'apparaissent pas comme prévu, recommencer la procédure
d'étalonnage selon l'étape 1, une fois l'affichage terminé.
5. Si la valeur d'étalonnage (étape 8) est autre que "2,0", retirer le standard d'étalonnage et essuyer l'ex-
térieur du tube avec un Kimwipe ou un chiffon propre afin d'éliminer toutes taches, traces de doigt, etc. et
réétalonner.
6. Il n'est pas nécessaire d'étalonner entre les mesures des échantillons ; le standard d'étalonnage CrystalSpec
(S) devrait toutefois être lu comme échantillon quotidiennement. Si le standard mesure 1,9, 2,0 ou 2,1, l'in-
strument est calibré et n'a pas besoin d'être ré-étalonné.
7. L'étalonnage devrait être stable si les conditions ambiantes de température et de lumière restent rela-
tivement constantes. Un réétalonnage est recommandé si ces conditions changent.
8. Attendre que la procédure d'étalonnage soit bien terminée (étapes 1 – 8) avant d'appuyer sur le bou-
ton d'analyse. Le CrystalSpec ne sera pas autrement correctement étalonné et les résultats seront
invalides.
PROCEDURES D'ANALYSE – Des tubes en verre, transparents à fond plat de 16 – 17 mm de diamètre
doivent être utilisés pour les échantillons. Les microorganismes peuvent être mis en suspension dans de
l'eau, du sérum physiologique, ou un milieu de culture clair de couleur jaune à marron pâle (soit Bouillon
Mueller-Hinton, TSB, ou Bouillon BHI). L'utilisation de toute autre couleur comme milieu de suspension est
déconseillée. Un minimum de 2,0 mL de liquide est nécessaire.
1:34 PM Page 3
Conditions ambiantes de fonctionnement
(appareil et tubes de calibration) .......... 20 °C à 30 °C
Taille des tubes pour échantillon ..........16 – 17 mm diamètre,
3
Français
8
UFC/mL.
2 et des suspensions
4
en verre à fond plat