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I. Introduction
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Trisensor est un test rapide qui permet de détecter simultanément la présence de molécules de ß-lactames,
Sulfamides et Tétracyclines dans un échantillon de lait.
II. Résumé du protocole
•
Ajoutez 200 µl de lait dans une microcuvette et mélangez afin d'obtenir une solution homogène ;
•
Incubez 3 min à 40 °C ;
•
Introduisez une bandelette dans chaque microcuvette ;
•
Poursuivez l'incubation pendant 3 min à 40°C ;
•
Interprétez le résultat.
III. Mécanisme de la réaction
Trisensor est un test de compétition qui se base sur la reconnaissance de deux récepteurs pour les ß-lactames
et Tétracyclines et d'un anticorps monoclonal générique pour les Sulfamides, en une seule opération. Ce test
fait intervenir deux composants : d'une part une microcuvette contenant une certaine quantité de récepteurs
et d'anticorps fixés à des particules d'or colloïdal, d'autre part une bandelette, composée de membranes, sur
laquelle se trouvent des lignes de capture. Pour que le test soit valide, la ligne contrôle rouge doit être visible
après la seconde incubation (voir Figure A). Les 3 autres lignes, situées sous la ligne contrôle, sont les lignes
spécifiques de capture. La ligne des ß-lactames (pénicillines et céphalosporines) se trouve sous la ligne des
sulfamides, et la ligne des tétracyclines est placée au-dessus. Lorsque l'échantillon de lait est mis en présence
des réactifs, les antibiotiques éventuellement présents se fixent sur les récepteurs et les anticorps monoclonaux
au cours de la première incubation de 3 minutes à 40 °C. Ensuite, lorsque la bandelette est introduite dans le
mélange, le liquide commence à migrer verticalement sur la bandelette pour traverser les zones de capture.
Si l'échantillon ne contient pas d'antibiotiques, le développement de couleur rouge, apparaissant à la ligne de
capture respective, sera plus important que celui de la ligne de contrôle. Par contre, la présence d'antibiotique
dans l'échantillon fera apparaître, à la ligne de capture respective, un signal coloré égal ou moins important que
celui du contrôle.
IV. Composition des kits
Les kits de Trisensor Milk contiennent les éléments nécessaires à la réalisation de 96 tests:
•
12 tubes contenant chacun 1 barrette de 8 microcuvettes de réactifs et 8 bandelettes ;
•
1 micropipette de 200 µl ;
•
1 "contrôle positif" sous forme de poudre pour reconstituer un lait cru positif à la PenG, la
Sulfadimethoxine et l'Oxytétracycline. Ce contrôle positif contient un colorant rouge clair ;
•
1 « contrôle négatif » sous forme de poudre pour reconstituer un lait cru négatif. Ce contrôle négatif
contient un colorant vert clair ;
•
1 protocole d'utilisation.
V. Matériel supplémentaire
•
1 Heatsensor (incubation à 40°C, voir le manuel d'utilisation du Heatsensor).
•
1 Readsensor (en option, voir le manuel d'utilisation du Readsensor).
VI. Remarques générales
1.
Pour toute lecture instrumentale des résultats, il faut allumer le Readsensor avant de débuter
l'analyse (voir le manuel d'utilisation du Readsensor) ;
2.
Dès réception du kit, placez-le dans un endroit sec et à une température entre 2°C et 8°C. Avant
d'ouvrir les pots de réactifs, laissez-les revenir à température ambiante et évitez toute exposition
du produit à l'humidité et à la lumière ;
3.
Les contrôles se présentent sous formes de fioles en verres. Il faut reconstituer les fioles de lait
contrôle avec 1ml (5 X 200μl) d'eau pure. Mélangez énergiquement (à l'aide d'un vortex) pour
obtenir une solution homogène. Les fioles en verre reconstituées peuvent se conserver à -20°C,
mais elles ne peuvent être congelées / décongelées qu'une seule fois ;
4.
Evitez d'utiliser un lait contenant des grumeaux avec les tests Trisensor ;
5.
La température idéale pour réaliser le test Trisensor est de 40°C ± 3°C. Il est recommandé d'utiliser
le Heatsensor (ou, à défaut, un bain marie). Tout autre type d'incubateur n'est pas approprié (voir
le manuel d'utilisation du Heatsensor pour le programmer correctement) ;
6.
Après la seconde incubation, retirez directement le filtre de chaque bandelette et lisez le résultat
endéans les 10 minutes ; ne réalisez plus de lecture après 10 minutes ;
7.
Au séchage, l'intensité de la couleur des lignes de capture devient plus forte ;
8.
Lorsque le test est positif, confirmez ce résultat ;
9.
Videz d'abord un pot avant d'en ouvrir un autre.
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