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externo, al que se puede acceder desde el lateral derecho del instrumento. Esta conexión de láser
externo aloja una fuente láser externa acoplada mediante fibra para la detección LIF.
Aplicaciones admitidas
Ensayo de pureza/heterogeneidad de IgG
El ensayo de pureza/heterogeneidad de IgG incluye métodos para resolver tanto inmunoglobulinas
reducidas como no reducidas por tamaño y para cuantificar posteriormente la heterogeneidad
y las impurezas que puedan existir en una determinada preparación de IgG. La metodología consiste
en la desnaturalización térmica de una determinada concentración de proteína en presencia de SDS.
Una vez desnaturalizada, la muestra se separa por tamaño en un capilar que contiene una matriz
de polímero SDS reemplazable, que proporciona el cribado selectivo para la separación.
Análisis de peso molecular de SDS
La electroforesis capilar (EC) se ha convertido en una alternativa eficaz para los procesos manuales
de electroforesis en gel en laboratorio debido a su automatización, cuantificación, alta velocidad
y alta eficiencia. Muchas biomoléculas, como las proteínas y los ácidos nucleicos, se separan
mediante la electroforesis de cribado molecular mediante matrices de gel, un método que se conoce
como electroforesis de gel capilar (CGE). La separación es el resultado de la migración diferencial
del analito a través de una matriz de gel. En este caso, las moléculas más pequeñas se mueven más
rápido que las moléculas grandes a través del gel de separación. Para los polipéptidos y las
proteínas, es necesario desnaturalizar la muestra en presencia de SDS, un detergente aniónico
que une las proteínas en una relación constante de 1:1,4 de proteína. La propiedad de masa-carga
constante de las proteínas unidas mediante SDS permite la separación según las diferencias de peso
molecular de las proteínas.
El ensayo de análisis SDS-MW está diseñado para la separación de complejos de proteína-SDS
utilizando una matriz de gel reemplazable. El gel está formulado para ofrecer un rango de cribado
eficaz de aproximadamente 10 kDa a 225 kDa. Dentro de este rango de tamaños, el logaritmo
de la masa molecular de la proteína es lineal con su movilidad electroforética recíproca. El peso
molecular de una proteína desconocida puede estimarse a partir de una curva patrón de tamaños
de proteínas conocidas. Este kit puede cuantificar la cantidad de proteína y calcular la pureza
de un producto de proteína.
Análisis de isoelectroenfoque capilar (cIEF)
El isoelectroenfoque (IEF) se utiliza para la separación de proteínas en función de diferencias
en sus puntos isoeléctricos. El método IEF se lleva a cabo por medio de la electroforesis de proteínas
o péptidos a través de un gradiente de pH estable hasta alcanzar el pH igual a su punto isoeléctrico (pI),
punto en el cual la carga neta y la movilidad son cero.
El punto isoeléctrico (pI) de una proteína o péptido desconocido se puede calcular a partir del
trazado de calibración del tiempo de migración de los marcadores de pI internos frente a su pIs
conocido. Por lo tanto, además de proporcionar separación con alta resolución, el ensayo puede
utilizarse para el cribado de amplia gama (pI 4-10) y la identificación de pI de proteínas y péptidos.
Guía de descripción general del sistema
RUO-IDV-05-5521-ES-B | A51963AF
Descripción general del sistema
Sistema de análisis farmacéutico PA 800 Plus
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