geles más delgados, no obstante, se debe tener cuidado para
que los pocillos sean suficientemente profundos para acomodar
el volumen de muestra que se desea
N.º catálogo
Descripción del
peine
E0167
1 mm, 14 dientes
E0167
1 mm, 28 dientes
E0168
1 mm, 5 dientes
E0168
1 mm, 8 dientes
6. Tome nota del volumen total de la solución para que se pueda
determinar y corregir el grado de evaporación.
7. Caliente la suspensión de agarosa en un microondas durante
90 segundos. Agite el matraz para asegurarse de que penetran
en la solución los granos adosados a las paredes. La agarosa
sin disolver se muestra como pequeñas "lentes" que flotan en la
solución. Caliente de nuevo entre 30 y 60 segundos. Vuelva a
examinar la solución y repita el proceso de calentamiento hasta
que la agarosa se disuelva completamente.
8. Añada agua desionizada para reemplazar cualquier volumen
que se haya perdido por evaporación durante el proceso de
calentamiento.
Continúe con Sección C, Paso 1, "Moldeo del gel" en la página 12.
B. Preparación del gel de agarosa y el tampón de electroforesis - ARN
Las moléculas de ARN se separan mediante electroforesis mediante geles
desnaturalizantes antes del análisis mediante hibridación northern. Para la
electroforesis de ARN se utilizan habitualmente geles de agarosas que
contienen formaldehído
(1, 2, 3)
para la electroforesis de ARN utilizando geles de formaldehído.
¡PRECAUCIÓN!
Todos los equipos y soluciones utilizados en el
siguiente protocolo deben tratarse con DEPC (pirocarbonato
de dietilo) o anhídrido acético antes de usar para inhibir la
actividad de RNasa (véase el protocolo en la Sección II,
página 4). Se recomienda que se realicen soluciones
especializadas exclusivamente para el trabajo de ARN para
reducir al mínimo el riesgo de degradación de la muestra
debido a actividad de RNasa.
NOTA:
Se ha informado de que la tinción de muestras de ARN con
.
Anchura de los
pocillos
5 mm
2,5 mm
8 mm
4 mm
. A continuación se presenta un protocolo general
Volumen de la
muestra 1 mm
5 ul
2,5 ul
8 ul
4 ul
