PRECAUCIÓN:
No sacuda o golpee la cubeta de gel cuando la tapa
esté colocada. El interruptor de seguridad se acciona por un
sensor de efecto Hall que depende de un imán situado en la
tapa. Al mover la cubeta de gel se puede mover la tapa y
hacer que la unidad haga una pausa hasta que se vuelva a
poner la tapa en su sitio.
G. Electroforesis de muestra
La tensión máxima aplicada que se sugiere para la
electroforesis de ADN en geles de agarosa utilizando la Gel
XL es de 150 voltios. En un gel TBE al 1 % esto se traduce
en una duración del ciclo de aproximadamente 1 hora. Se
pueden usar tensiones más bajas, sin duda, y como regla
general, un ciclo a 70 voltios tardará dos veces más que un
ciclo a 140 V. Se pueden utilizar tensiones más elevadas
para disminuir el tiempo del ciclo, pero si la unidad está
funcionando a tensiones de más de 140 V, el calor generado
durante la electroforesis puede disminuir la resolución de la
muestra. Dichos artefactos pueden evitarse teniendo la
unidad en marcha en una sala fría o añadiendo "cubitos de
hielo" de tampón de electroforesis 1X para mantener
correctamente refrigerada la unidad.
PRECAUCIÓN:
NO SUPERE LA TENSIÓN MÁXIMA DE
FUNCIONAMIENTO DE 150 VOLTIOS.
Los parámetros de ejecución que se sugieren para la
electroforesis del ARN en geles de agarosa que contienen
formaldehído son de 60 a 80 voltios.
PRECAUCIÓN:
Los vapores de formaldehído son tóxicos. La
electroforesis de ARN en geles que contengan formaldehído
debe realizarse dentro de una campana de vapores.
Siga la migración de la muestra en el gel utilizando el
colorante de carga como indicador. (Véase la fórmula de
Tampón de carga de muestras en el Apéndice A.) Permita
que las muestras migren hasta que los fragmentos se hayan
separado, normalmente hasta que el frente de tinte azul de
bromofenol haya migrado hasta 3/4 del gel.
NOTA:
Si el gel contiene bromuro de etidio, el progreso de la
electroforesis se puede controlar durante el ciclo
desconectando el suministro de alimentación, retirando la
tapa e iluminando con una luz ultravioleta de onda media
en el gel. Las bandas resueltas aparecerán como bandas
