Tabla de contenido
Preparación
Opcional: refrigeración pasiva
Enfriar aproximadamente 2 litros de agua
desionizada a 4 °C. (Llenar el tanque con agua
fría sirve como un disipador de calor durante la
electrotransferencia.)
Prepare el tampón de transferencia
Montaje de la pila requiere aproximadamente
250 ml de tampón de transferencia y una adicio-
nal 300-350 ml de tampón es requerido para
llenar cada módulo. La receta para el buffer de
Towbin se enumeran a continuación. La biblio-
grafía en la página 26 se enumeran las fuentes de
otros tampones.
Towbin tampón
(25 mM Tris, 192 mM glicina, 0–20% (v/v) metanol,
pH 8.3, 1 liter)
Tris (FW 121.1)
Glicina (FW 75.07)
SDS* (FW 288.4)
* Opcional: agregar SDS puede mejorar la eficiencia
de transferencia.
Disolver en 750 ml de agua destilada.
Añadir metanol según sea necesario.
Dependiendo del tipo de membrana seleccionada,
añadiendo metanol puede mejorar los resultados de
transferencia. Debido a tampones que contengan
metanol puede deteriorarse si se almacena por largos
períodos, con metanol, justo antes de la transferencia.
Llevar a 1 litro con agua destilada. No ajustar el pH,
el cual debe estar entre 8,2 y 8,4.
Opcional: Chill antes de su uso.
25 mM
192 mM
hasta 0.1% (3.5 mM)
3.0 g
14.4 g
1.0 g
•
p19
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Solución de problemas
