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Gel de agarosa notas electroforesis
Electroforesis en gel de agarosa se puede utilizar
para separar fragmentos de ADN tan pequeñas
como 0,1 kb o menos. Los geles de poliacrila-
mida se utilizan generalmente para los fragmen-
tos más pequeños que 1 kb.
La movilidad del ADN
Sugerida concentración de agarosa para separar
fragmentos de diferentes tamaños se dan en
la Tabla 1 a continuación. Otros factores que
afectan a los resultados de separación incluyen
el funcionamiento de amortiguación, ajuste
de tensión, temperatura, conformación, y la
presencia de bromuro de etidio. Agarosas
especiales están disponibles que pueden ampliar
la gama de la resolución.
Una norma común es un compendio Hind III
del fago lambda, lo que da ocho fragmentos que
varían en tamaño de 0,1 a 23 pares kb. Para una
buena resolución, correr 45 minutos a 10 cm de
largo, 1% en gel de agarosa en gel TBE 0.5X
a 150 V.
Tabla 1: Las concentraciones de agarosa para
separar fragmentos de ADN de varios tamaños
agarose (%)
0,5
0,7
1,0
1,2
1,5
*Current Protocols in Molecular Biology, p 2.5.2 (1993)
alcance efectivo de la resolución
de los fragmentos de ADN lineal* (kb)
1,0 –30
0,8–12
0,5–10
0,4–7
0,2– 3
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