7 Resolución de problemas
7.2 Problemas relacionados con el ensayo
7.2
Problemas relacionados con el ensayo
Consideraciones sobre el ligando
Una inmovilización inadecuada o la pérdida de actividad del ligando en la superficie del
chip del sensor son las causas comunes de los problemas relacionados con la aplicación.
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Consideraciones sobre las
muestras
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Si no puede inmovilizar suficiente ligando que conserve su capacidad de unión a los
analitos, pruebe métodos alternativos de inmovilización o utilice un enfoque de
captación. En algunos casos puede ser suficiente realizar la inmovilización a un pH
más suave o evitar lo más posible la exposición del ligando a la solución amortigua-
dora de inmovilización. Los métodos de inmovilización personalizados pueden admitir
la disolución del ligando en la solución amortiguadora de inmovilización inmediata-
mente antes de la inyección, para los ligandos que no soportan las condiciones de
exposición prolongada a la inmovilización.
No intente inmovilizar el ligando en los chips del sensor que hayan sido guardados
por períodos largos de tiempo En espera con agua destilada. No se puede garantizar
el rendimiento de los chips del sensor guardados en agua o en entornos con fuerza
iónica. Normalmente debe acoplar el chip sensor inmediatamente antes de realizar
la inmovilización. Si hay un retraso importante entre el acoplamiento y la inmoviliza-
ción, use una solución amortiguadora de funcionamiento HBS o similar como solución
amortiguadora en espera.
Asegúrese de que el ligando soporte las condiciones de regeneración sin pérdida
de actividad. Si no puede lograr las condiciones de regeneración adecuadas, consi-
dere utilizar un enfoque de captación para usar un ligando nuevo en la superficie
para cada ciclo de análisis.
No vuelva a acoplar los chips del sensor usados después de retirarlos del instrumento.
Asegúrese de que las muestras no se precipiten con las concentraciones y condicio-
nes de solución amortiguadora utilizadas. Incluso la microprecipitación en la super-
ficie puede afectar gravemente la detección y en general se percibe a modo de ruido
excesivo e irregularidades en los sensogramas.
Siempre que sea posible, las muestras deben prepararse en solución amortiguadora
de funcionamiento o en condiciones similares. Los cambios drásticos en la compo-
sición de la solución amortiguadora entre la solución amortiguadora de funciona-
miento y la muestra pueden introducir defectos que quizás sean difíciles de interpre-
tar.
Biacore 4000 Instrucciones de funcionamiento 28-9667-08 AC
