Tabla de contenido
recopilar los datos de ejecución y realice la ejecución.
Siga los pasos de la sección 6 para generar los informes
de ejecución.
C. Métodos de investigación definidos por el usuario (sólo para
investigación)
El Maxwell
®
16 IVD Instrument permite la generación y el
uso de métodos definidos por el usuario sólo para la
investigación. Puede generar un método que optimice la
purificación a partir de tipos de muestras complicadas o
aplicaciones únicas. Puede establecer los tiempos de
procesamiento de muestras definidos por el usuario para
la lisis, enlace, secado y elución. Asimismo, el número de
ciclos puede personalizarse para muestras concretas. Los
nuevos parámetros de ejecución pueden guardarse en el
instrumento como método de usuario. Las posibles ventajas
y desventajas de modificar estos parámetros se enumeran
a continuación. El efecto real de cualquier modificación se
determinará mediante las pruebas que realice el usuario.
El usuario debe optimizar los parámetros.
Posibles efectos de modificar los parámetros de ejecución
Modificación de los tiempos de lisis: Es el período durante
el cual el émbolo mezcla la muestra antes de añadirle las
partículas de MagneSil
®
•
Posibles ventajas: lisis completa de la muestra si es
necesario recuperar ADN, ARN o proteínas. El tiempo
óptimo de lisis para un tipo de muestra específica
depende del tiempo necesario para una lisis adecuada
de las muestras. Algunas muestras no precisarán un
tiempo de lisis adicional tras el preprocesamiento,
mientras que otras muestras se beneficiarán de un
tiempo de lisis ampliado.
•
Posibles desventajas: los tiempos de lisis ampliados
pueden resultar en la formación de precipitados, lo que
podría interferir en la purificación y las aplicaciones
posteriores.
Tiempo de enlace aumentado: éste es el tiempo permitido
para el establecimiento de enlaces por parte de las partículas
MagneSil
®
que contienen el ácido nucleico o proteína.
•
Posibles ventajas: la recuperación máxima requiere unos
enlaces eficientes entre las moléculas objetivo y las
partículas magnéticas. Un tiempo de enlace aumentado
puede aumentar los enlaces de las moléculas objetivo.
•
Posibles desventajas: los tiempos de enlace incrementados
pueden aumentar el arrastre de detergentes,
contaminantes y otros componentes que podrían afectar
a la pureza o inhibir las aplicaciones posteriores.
Promega Corporation
2800 Woods Hollow Road • Madison, WI 53711-5399 USA
Toll Free in USA 800-356-9526 • Phone 608-274-4330
Manual técnico del Maxwell
.
®
16 IVD Instrument
Tiempo de secado aumentado: ésta es la cantidad de
tiempo antes de elución que las partículas se secan al aire.
•
Posibles ventajas: el exceso de alcohol de los tampones
de lavado pueden interferir en las aplicaciones
posteriores, como la electroforesis en gel, PCR y
reacciones enzimáticas. El aumento de tiempo de secado
puede eliminar el exceso de alcohol del objetivo.
•
Posibles desventajas: el secado excesivo puede reducir la
recuperación de moléculas objetivo de las partículas
MagneSil
®
.
Tiempo de elución aumentado: ésta es la cantidad del
tiempo que se utiliza el émbolo para mezclar las partículas
en el tampón de elución.
•
Posibles ventajas: la recuperación eficiente de las
moléculas objetivo precisa la extracción de las partículas
®
MagneSil
. Si se aumenta el tiempo de elución, es
posible que se mejore la extracción de las moléculas
objetivo de las partículas MagneSil
•
Posibles desventajas: un tiempo de elución excesivo puede
resultar en la liberación de detergentes y otros
componentes que podrían inhibir las aplicaciones
posteriores. Asimismo, el tampón de elución podría
evaporarse durante períodos prolongados de elución
calefactada.
Aumento en el número de ciclos: es el número de veces
que se repetirá el proceso completo.
•
Posibles ventajas: si se aumenta, podría darse una mayor
recuperación de las moléculas objetivo.
•
Posibles desventajas: si se aumenta, podría darse la
transferencia de detergentes, contaminantes y otros
componentes que podrían inhibir las aplicaciones
posteriores.
Configuración predeterminada del Maxwell
para métodos preprogramados
Los valores para los métodos preprogramados del
Maxwell
®
16 IVD Instrument se proporcionan en la tabla
6 para LEV y en la tabla 7 para SEV. Se pueden utilizar
como guía para seleccionar los valores para los métodos
personalizados
Tabla 6. Parámetros predeterminados para el método LEV
(ARN)
Paso
ARN
Lisis
3,00 minutos
Enlace
2,00 minutos
Secado
3,00 minutos
Elución
5,00 minutos
Ciclos
1
®
.
®
Instrument
part# TM315
rev. 4/15
35
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