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Localización y solución de problemas
Los reactivos de limpieza del procesador proporcionan un método automatizado adecuado para
eliminar la parafina y volver a colocar el tejido en alcohol. Sn embargo, es un método
potencialmente más agresivo que los métodos A o C.
C. Proceso de inversión lenta
Procese utilizando un protocolo de limpieza modificado durante un período igual al tiempo
necesario para procesar más adelante el tejido (ver Protocolo de limpieza inversa lenta a
continuación). A continuación repita el procesado con formalina utilizando un programa adecuado
al tamaño y la naturaleza de la muestra (ver 8.2.1 Tipo de muestra y duración del protocolo).
El proceso de inversión larga es muy suave para el tejido. Es la mejor opción cuando se dispone del
tiempo necesario.
D. Reprocesado directo
En este método, no se elimina la parafina antes del reprocesado. Vuelva a colocar las casete
directamente en formalina y luego, sin ningún otro tratamiento previo, repita el proceso utilizando
un programa adecuado al tamaño y la naturaleza de la muestra (ver 8.2.1 Tipo de muestra y
duración del protocolo).
Este método es el más rápido, pero provoca la contaminación por parafina de los reactivos del
procesador. Cambie todos los reactivos (excepto la parafina) después del reprocesado directo.
7. Tejido afectado por formalina durante el aclarado o la infiltración con
parafina
Este problema puede ocurrir cuando una válvula de escape permite el reflujo de la formalina al
baño de parafina. Si observa este problema, póngase en contacto con el servicio de atención al
cliente para que revise su equipo.
La contaminación por formalina se caracteriza por un tono azulado de los núcleos, una pérdida de
los detalles de la cromatina, la contracción del núcleo, una eosinofilia variable y la inflamación y/o
contracción del citoplasma.
Primero derrita los bloques, retire la parafina sobrante y luego coloque las muestras en casete
nuevas. Esto minimiza la contaminación por parafina de los reactivos del procesado. Procese a la
inversa los bloques mediante uno de los métodos indicados en el problema 6. Después, sumérjalos
en una solución de recuperación Tris-HCI con pH alto (por ejemplo, Bond Epitope Retrieval Solution
2) durante entre 2 - 12 horas a temperatura ambiente.
Este tratamiento mejora las cualidades de tinción de la H&E, las cualidades de corte del tejido y la
cohesión de la sección. Es poco probable que los detalles del núcleo y la inflamación y definición del
citoplasma mejoren.
8. Tejido poco procesado fijado incorrectamente
Un posible remedio es procesar lentamente el tejido de forma inversa (ver 6C), aplicar una fijación
de formalina adicional y luego repetir el procesado mediante un programa adecuado al tamaño y la
naturaleza de la muestra (ver 8.2.1 Tipo de muestra y duración del protocolo).
El tejido sin fijar o con una mala fijación se daña durante el procesado: el alcohol y las altas
temperaturas ejercen un efecto de fijación diferente al del formaldehído. Como resultado, los
Leica PELORIS Manual de usuario. Rev. K © Leica Biosystems Melbourne Pty Ltd 2011
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