2.1.2.4 Barrido
Los detectores equipados con monocromadores de excitación y emisión pueden barrer
fácilmente varias longitudes de onda de excitación o emisión. Cambiar la longitud de onda
implica cambiar también la configuración del monocromador. Durante un barrido, la configuración
de un monocromador se mantiene constante mientras el otro monocromador barre varias
longitudes de onda.
2.1.2.5 Funcionamiento multicanal
Los detectores equipados con monocromadores de excitación y emisión pueden cambiar la
longitud de onda de los valores de excitación y emisión. En funcionamiento multicanal, los dos
monocromadores se mueven rápidamente entre los pares de longitud de onda seleccionados
para producir múltiples trazados del cromatograma. Las múltiples salidas pueden entonces
proporcionar información adicional a partir de una única separación.
2.1.2.6 Datos de fluorescencia
Los detectores presentan sus datos en unidades de intensidad (emisión) o energía de
fluorescencia. Además, el detector ACQUITY Premier FLR también representa intensidad
usando unidades normalizadas para compensar la variabilidad entre detectores individuales y
ajustar cualquier disminución de la intensidad de la lámpara relacionada con el paso del tiempo.
Cuando se utilizan unidades normalizadas, los cambios en la ganancia mejoran la relación
señal-ruido pero no cambian la respuesta de los picos, lo que confiere un alto grado de
reproducibilidad de las mediciones de las señales fluorescentes entre un sistema y otro.
2.1.2.6.1 Unidades de emisión y normalización
El detector ofrece dos tipos de unidades de salida: emisión y energía. Las unidades de emisión
se normalizan a una referencia de agua estándar y su magnitud es tan independiente de la
ganancia del fotomultiplicador (PMT) como sea posible. Se pueden compensar los cambios que
normalmente influyen en la intensidad de la señal de las mediciones de fluorescencia, como la
degradación de los componentes ópticos o de la lámpara, renormalizando periódicamente a la
referencia de agua estándar. Esta renormalización reduce las variaciones de intensidad de las
señales de fluorescencia de un detector a otro.
La siguiente ecuación sirve para calcular el valor de las unidades de emisión (EU) en cualquier
momento (t):
donde:
• Gain
(Ganancia
Raman
reciente de la función de normalizar unidades.
• PMTCounts
de datos.
La normalización de las unidades de emisión da como resultado una intensidad de la señal
agua/Raman, en E
) y Counts
Raman
(RecuentosPMT
) y Gain
t
t
365 nm/E
416 nm, de 100 unidades de emisión. La señal del espectro de
x
m
10 de noviembre de 2021, 715006949ES Versión 01
(Recuentos
Raman
Raman
(Ganancia
) = valores en el momento de la recogida
t
t
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) = valores de la ejecución más