Tabla de contenido
MANIPULACIÓN DE LA PREPARACIÓN
Equipo y reactivos necesarios
Jarra tipo Coplin
Acetona
Alcohol puro
Xileno de grado reactivo
Pinzas o aguja de corte
El «método A» ha sido probado con muestras de
citología, histología y hematología. La película se retira
sin causar casi ningún daño en la muestra y el
portaobjetos puede volver a teñirse y/o cubrirse.
1. Coloque el portaobjetos cubierto en una jarra de tipo
Coplin con acetona. Deje que permanezca en la jarra
durante tres o cinco minutos. Retire el portaobjetos y,
con la ayuda de una pinza o una aguja de corte,
levante la película de montaje y retírela del
portaobjetos. Una fina capa de medio de montaje
permanecerá en el portaobjetos.
NOTA: después de tres minutos de exposición a la
acetona, la película seguirá unida al portaobjetos y deberá
retirarse con suavidad. Esto limita la exposición directa
del tejido teñido a la acetona, lo que reduce la cantidad de
despolarización. Este periodo más breve debe usarse si el
portaobjetos
se
va
aproximadamente cinco minutos de exposición, la película
cae sola del portaobjetos. Sin embargo, el tejido no está
en contacto directo con la acetona y la tinción se
desvanecerá. No supone un problema si el tejido va a
decolorarse y volver a teñirse.
2. Pase el portaobjetos por tres cambios de alcohol puro
de 30 segundos cada uno para retirar los residuos de
acetona. Siga con tres cambios de xileno de un
minuto cada uno para retirar el medio de montaje.
3. Si el portaobjetos se va a volver a cubrir
inmediatamente, retírelo del último baño de xileno y
procéselo de inmediato en el cubreobjetos Tissue-
Tek Film. Si la muestra va a decolorarse y volver a
teñirse, retire el portaobjetos del último baño de
xileno y colóquelo en un cuarto cambio de alcohol
puro durante 30 segundos. Decolore y vuelva a teñir
la muestra como desee.
El «método B» lleva a la retención de la pieza original
de película de montaje. Esto sería necesario si alguna
muestra queda eventualmente unida a la película y no al
portaobjetos.
4.2
a
volver
a
cubrir.
1. Sumerja
aproximadamente un minuto para reactivar la resina
de la película.
2. Coloque el portaobjetos sobre una superficie plana.
Presione con suavidad la superficie de película con
un papel absorbente entre cinco y diez minutos para
que absorba el exceso de xileno y para eliminar todas
las burbujas (no elimine una burbuja con un objeto
afilado, ya que podría dañar la superficie de la
película).
El «método C» retira el trozo de película de montaje e
impide que este se vuelva a utilizar. Debe usarse para
retirar completamente la película de montaje. Este método
también debe utilizarse si se observa una burbuja cerca
del borde o si el borde está suelto.
1. Coloque
30 segundos y cinco minutos para soltar la película.
2. Inmediatamente después, coloque el portaobjetos en
una solución con un 50 % de xileno y un 50 % de
acetona, entre 30 y 45 segundos.
3. Con cuidado, retire la película de montaje suelta de la
superficie del portaobjetos. Si resulta difícil retirar la
película, repita los pasos 1 y 2.
Tras
4. Introduzca de inmediato el portaobjetos en xileno
durante un minuto y agite con suavidad.
5. Transfiera el portaobjetos a un segundo enjuagado
de xileno durante un minuto, para garantizar que se
ha retirado completamente la resina del montaje de
preparaciones.
6. Vuelva a cubrir el portaobjetos de muestras siguiendo
los procedimientos recomendados.
el
portaobjetos
en
xileno
el
portaobjetos
en
Revisado el 08/08/2013
durante
acetona
entre
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