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Alias
Este campo permite establecer un valor de canal personalizado. Haga clic en el campo
para introducir un valor de Alias, que puede constar de un máximo de 7 caracteres
alfanuméricos (por ejemplo, nombre del colorante, organismo, etc.). Solo se puede
asignar un alias por canal, sin importar si está activado para PCR y/o desnaturalización.
El alias reemplaza la etiqueta de longitud de onda en las pantallas de PCR,
desnaturalización y cuantificación, así como en los informes asociados.
Ganancia desnatur.
El campo Ganancia desnatur. permite cambiar el nivel de potencia de esa longitud de
onda. Resalte el valor mostrado e introduzca un valor (0–100) o bien haga clic en el botón
«+» o «-» para incrementar o reducir (en tramos de 10) el valor de amplificación. El valor
predefinido de Ganancia desnatur. es 0, pero la ganancia debe ser superior a 0 para
guardar un test Solo desnaturalización.
Cuando se asigna una ganancia de desnaturalización a un canal, se activan los campos
Dirección de picos, Sensibilidad y Contenedores de desnaturalización.
Dirección pico
El campo Dirección pico permite configurar la dirección prevista de la curva de
desnaturalización.
La primera derivada negativa del cambio en la fluorescencia (-d(RFU)/dT) se representa
gráficamente como una función de la temperatura. Las tecnologías de detección más
comunes producen una reducción de la señal fluorescente con el aumento de la
temperatura y la separación de las cadenas de ácido nucleico. En la reacción, la primera
derivada negativa muestra uno o varios picos diferentes a la temperatura de
desnaturalización (Tm) de cada producto. La selección de la dirección de los picos
modificará el comportamiento del algoritmo para que aparezcan los valores finales de Tm
en los informes.
•
La configuración predefinida es Pico. Cuando se selecciona Pico en Dirección pico,
esos picos se utilizan para notificar los valores finales de Tm.
Si la tecnología de detección hace que la señal fluorescente aumente con el incremento
de la temperatura, las temperaturas de desnaturalización se representarán como picos
invertidos (o puntos más bajos) en el gráfico de la primera derivada negativa.
•
Cuando se selecciona Punto más bajo en Dirección pico, los picos invertidos se
utilizan para notificar los valores finales de Tm.
Sensibilidad
El campo Sensibilidad permite controlar la sensibilidad del algoritmo de desnaturalización.
Para ajustar la sensibilidad se puede utilizar una de tres configuraciones disponibles.
•
Perfil de sensibilidad bajo: solo los picos grandes y bien definidos generarán un valor
final de Tm en el resultado.
•
Perfil de sensibilidad normal: compensa la necesidad de recurrir a valores de Tm
derivados de cambios menores en la fluorescencia con la necesidad de ignorar los
cambios mínimos que quizá no estén relacionados con la desnaturalización de los
ácidos nucleicos.
•
Perfil de sensibilidad alto: ofrece mayor predisposición a utilizar valores de Tm
derivados de pequeños cambios en la fluorescencia en un intervalo de temperaturas.
5 – Referencia
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