Qiagen PyroMark Q24 Manual De Uso página 25

10. Prepare una mezcla maestra para inmovilización del ADN según se
indica en la tabla 4. Prepare un volumen un 10% mayor que el
volumen necesario para el número total de reacciones que vayan a
realizarse.
Tabla 4. Mezcla maestra para inmovilización del ADN.
Número de muestras
Estreptavidina-sefarosa de alto
rendimiento
Tampón de unión PyroMark
Agua ultrapura
Volumen total
* Proporciona una cantidad suficiente para las 8 muestras necesarias.
11. Diluya el PyroMark Q24 Control Oligo hasta 0,04 µM tal como se
muestra en la tabla 5.
Tabla 5. Dilución del PyroMark Q24 Control Oligo.
Componente
PyroMark Q24 Control Oligo
Tampón de dilución 1x*
Primera dilución seriada
Primera dilución seriada (de la anterior)
Tampón de dilución 1x*
Dilución final
* Asegúrese de que se haya diluido el tampón de dilución 10x suministrado con el PyroMark
Q24 Control Oligo con agua ultrapura antes de su uso. Consulte "Antes de comenzar",
página 23.
12. Agite el tubo que contiene la mezcla maestra y agregue 55 µl de la
mezcla maestra y 25 µl del PyroMark Q24 Control Oligo diluido
(0,04 µM) a 8 pocillos de una placa o de tiras de PCR de 24 pocillos.
13. Selle la placa de PCR (o las tiras) mediante tapas de tiras.
Manual de uso del PyroMark Q24 Control Oligo 06/2009
1
2 µl
40 µl
13 µl
55 µl
Volumen Concentración
10 µl
90 µl
100 µl
30 µl
1470 µl
1500 µl
9*
18 µl
360 µl
117 µl
495 µl
20 µM
–
2 µM
2 µM
–
0,04 µM
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