Qiagen PyroMark Q24 Manual De Uso página 18

Durante este paso, prepare la estación de vacío PyroMark Q24
MDx para la preparación de las muestras (consulte el Apéndice A,
página 43).
15. Agregue 25 µl de tampón de annealing PyroMark a cada pocillo de
una placa PyroMark Q24.
Mantenga uno de los portaplacas PyroMark Q24 (suministrados
con la estación de vacío PyroMark Q24 MDx) a temperatura ambiente
(15–25 °C) y utilícelo como soporte al preparar y mover la placa.
16. Coloque la placa (o las tiras) de PCR y la placa PyroMark Q24 en la
mesa de trabajo de la estación de vacío PyroMark Q24 MDx
(consulte la Figura 5).
Asegúrese de que la placa tenga la misma orientación que
durante la carga de las muestras.
Figura 5. Colocación de la placa (o las tiras) de PCR y de la placa PyroMark Q24
en la estación de vacío PyroMark Q24 MDx. Las posiciones marcadas contienen
etanol al 70% (1), solución desnaturalizante PyroMark (2), tampón de lavado PyroMark
(3) y agua ultrapura (4, 5). P: Posición de detención.
17. Abra el interruptor de vacío para aplicar vacío a la herramienta de
vacío.
18. Descienda con cuidado las sondas de filtro a la placa (o las tiras) de
PCR para capturar las microesferas que contienen el molde
inmovilizado. Mantenga las sondas en posición durante 15 s. Tenga
cuidado al asir la herramienta.
Las microesferas de sefarosa sedimentan rápidamente. Si ha
transcurrido más de 1 min desde la agitación de la placa (o de las tiras),
vuelva a agitarla(s) durante 1 min antes de capturar las microesferas.
19. Transfiera la herramienta al recipiente que contiene etanol al 70%
(recipiente 1). Enjuague las sondas de filtro durante 5 s.
20. Transfiera la herramienta al recipiente que contiene solución
desnaturalizante PyroMark (recipiente 2). Enjuague las sondas de
filtro durante 5 s.
18 Manual de uso del PyroMark Q24 Control Oligo 03/2015