9 Uso
1. Desembale la tapa y la placa en un entorno aséptico.
2. Deje las placas con la tapa quitada para desgasificarlas en el entorno aséptico durante
12 horas.
3. Caliente las placas sobre una plataforma calefactora o una incubadora antes de lle-
narlas con medio.
4. Rellene todos los pocillos con la aplicación de 25 µl de medio de cultivo equilibrado
durante el pre-cultivo en un entorno aséptico. El rellenado de los pocillos de lavado
es opcional. Cada uno puede contener aproximadamente 23 µl.
5. Con el microscopio, compruebe la posible presencia de burbujas de aire visibles, y
elimínelas con una punta de succión.
6. Llene el área de aceite con una capa confluyente de aceite mineral o aceite de parafina
adecuado para cubrir el medio de cultivo. No llene en exceso.
7. Ponga la tapa sobre la placa y déjela durante 4 horas para equilibrado en la incuba-
dora de CO
.
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8. Compruebe la presencia de burbujas de aire en los pocillos de cultivo tras el equili-
brado. Elimine las posibles burbujas con una punta de succión.
9. Introduzca los embriones en los pocillos. Asegúrese de que los embriones se han co-
locado con precisión en el centro del pocillo de cultivo y no en la pendiente lateral.
10. Opcionalmente, llene el depósito de pH e introduzca el tapón de silicona.
11. Incubar el CultureCoin
10 El uso ilustrado
Cada uno de los 14 pocillos está lleno con aproximadamente 25 µl de medio de cultivo. Los
pocillos de lavado también se pueden llenar, pero no es obligatorio. El embrión se coloca en
la parte inferior del área de cultivo.
en la MIRI
TL.
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Figura 10.1 Los pocillos
CultureCoin
Manual del usuario Rev. 4.0
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