Linealidad Del Instrumento - tecan SUNRISE Instrucciones De Utilizacion

7. Test de Funcionamiento/ Control de Calidad
7.4.3

Linealidad del Instrumento

7-10 Instrucciones de Utilización SUNRISE Absorbance Reader núm. 30004742 Rev. núm. 1.1
La linealidad del instrumento puede ser verificada usando una serie de diluciones
de una solución.
Por ejemplo: una serie de dilución de Metil Orange en solución % Tween 20 al
0,01 % para mediciones a 492 nm.
Para otras longitudes de onda, deben usarse diferentes soluciones
Las soluciones diluidas son entonces medidas sobre un espectrofotómetro de
referencia.
Se dibuja un gráfico de OD contra la concentración prevista y entonces se traza
la mejor línea recta a través de los puntos.
Los valores de absorbancia obtenidos para las diluciones son comparadas
entonces con el gráfico y se determina una concentración calculada de la
dilución a partir de la línea recta.
250 microlitros de cada dilución son pipeteados entonces en la microplaca, debe
usarse un mínimo de al menos dos muestras para cada dilución, para reducir los
errores causados por pipetear.
Cerciórese que el instrumento esté operando en el modo de medición Exacta .
La microplaca es medida entonces y se diseña un gráfico lineal del OD
comparado a la concentración a partir del promedio de los valores OD medidos y
de la concentración prevista para cada dilución-.
Los valores de absorbancia obtenidos para las diluciones son comparadas
entonces con el gráfico y se determinan a partir de una concentración calculada
de la dilución a partir de la línea recta.
Las concentraciones calculadas son entonces comparadas a partir del
espectrofotómetro y el instrumento en conjunto.
El porcentaje de imprecisión del instrumento se calcula con la fórmula
cCONC
% imprecisió n =
cCONC = concentración calculada
La imprecisión no debería ser mayor que:
Usando filtros estándares
Abs
Usando filtros gradientes
Abs
(instrumen to) - cCONC
cCONC (espectrof
492 nm
+/- 1 %
2.000 – 3.000 Abs
492 nm
+/- 2 %
TECAN
(espectrof otómetro)
otómetro)
0.000 - 2.000
+/- 1.5 %
0.000 - 2.500
2005-04
x 100