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Optimización del rendimiento
Volumen de retardo y volumen de columna extra
Volumen de retardo y volumen de columna extra
El volumen de retardo se define como el volumen del sistema entre el punto
de mezcla en la bomba y la parte superior de la columna.
El volumen extracolumna se define como el volumen entre el punto de inyec-
ción y el punto de detección, excluyendo el volumen en la columna.
Volumen de retardo
En las separaciones de gradiente, este volumen provoca un retardo entre el
cambio de la mezcla en la bomba y la llegada de dicho cambio a la columna. El
retardo depende de la velocidad de flujo y del volumen de retardo del sistema.
En realidad, esto significa que, en cada sistema HPLC, existe un segmento iso-
crático adicional en el perfil de gradiente al inicio de cada análisis. Por regla
general, el perfil de gradiente se indica en términos de los ajustes de mezcla de
la bomba y el volumen de retardo no se cita aunque afectará a la cromatogra-
fía. El efecto será más significativo a velocidades de flujo bajas y a volúmenes
de columna pequeños. Asimismo, puede afectar considerablemente a la trans-
feribilidad de los métodos de gradiente. Por lo tanto, para las separaciones de
gradiente rápidas, es importante tener volúmenes de retardo pequeños, espe-
cialmente en el caso de las columnas de diámetro estrecho (por ejemplo, con
un diámetro interno de 2,1 mm) que se suelen utilizar en la detección espec-
trométrica de masas.
El volumen de retardo de un sistema incluye el volumen de la bomba desde el
punto de mezcla y las conexiones entre la bomba y el inyector automático, así
como el volumen del paso de flujo a través del inyector automático y las
conexiones entre este y la columna.
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Manual de usuario de la bomba binaria Agilent 1290 Infinity