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Nota: El software del Countess
sus experimentos, compruebe primero el sitio web para ver si hay disponible una nueva versión de
software. Puede descargar la versión más reciente del software desde
www.thermofisher.com/countessupdate. También puede registrar su instrumento Countess
en www.thermofisher.com/registercountess para estar informado de cualquier actualización
futura del software.
Problema
Iluminación irregular de la pantalla (la
pantalla está oscura en un lado, pero
brillante en el otro).
El enfoque automático no parece
enfocar bien las células.
Algunas células aparecen en la
imagen, pero no se incluyen en el
recuento.
Las imágenes son muy brillantes y
descoloridas.
La fluorescencia es extremadamente
brillante y se diluye hacia otros filtros.
Se obtiene una concentración
incorrecta de las esferas de prueba
Countess
.
™
Guía del usuario del contador de células automático Countess™ II FL
Apéndice A: Solución de problemas
™
II FL se actualiza regularmente. Si tiene cualquier problema con
Recoloque la bandeja del cubo de luz seleccionando Change
Light Cube (Cambiar el cubo de luz) en la pantalla Instrument
Settings (Configuración del instrumento) (página 51).
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Habilite Auto Lighting (Iluminación automática) desde el menú
Profiles (Perfiles) o baje la intensidad de la luz del campo claro
antes de contar las células.
Reduzca la intensidad de la luz fluorescente antes de contar las
células.
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Posibles soluciones
Asegúrese de que no hay burbujas ni restos de suciedad
visibles en la pantalla que puedan interferir con el enfoque
automático y que dificulten que la muestra esté en el plano
focal correcto.
Idealmente, las células vivas deben tener el centro claro,
contrastando con las células muertas, que son totalmente
oscuras (página 59).
Establecer el foco nominal mejorará la consistencia del
enfoque automático con los próximos portaobjetos. Para
establecer el foco nominal, consulte la página 59.
Para los ensayos de recuento de células y viabilidad celular
realizados en el campo claro, ajuste los filtros de tamaño,
brillo y circularidad tanto para las células vivas como para
las muertas, para que todas las células se incluyan en el
recuento (página 28).
Para los ensayos de fluorescencia, ajuste los filtros de
tamaño, brillo, circularidad e intensidad de la fluorescencia
en todos los canales disponibles, para que todas las células se
incluyan en el recuento (página 39).
Después de incluir todas las células en el recuento, puede
acotar los criterios del recuento, si desea excluir células de
determinado tamaño o brillo.
Cuando los filtros se maximizan totalmente, el CSV debe
indicar 0-60 para el tamaño de la célula y 0-255 para el brillo.
Las esferas se pueden asentar rápidamente en la solución, lo
que afectará a la lectura de la concentración.
Agite la solución madre de esferas a nivel alto durante
30 segundos para resuspenderlas y añada de inmediato 10 µl
de suspensión de esferas a 10 µl de azul de tripano.
Pipetee el preparado de esferas y azul de tripano arriba y
abajo varias veces para asegurarse de que está bien mezclado
y cargue inmediatamente 10 µl en el portaobjetos.
II FL
™
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