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INSTRUCCIONES DE USO DEL MICROSCOPIO
CONFOCAL LEICA LCS SP5
INTRODUCCION: CARACTERISTICAS GENERALES
Láseres que tenemos en el microscopio confocal LEICA TCS SP5
Diodo Ultravioleta con una frecuencia de 405 nm para fluorocromos como el DAPI
Láser de Argón que dan frecuencias de 458 nm, 476 nm, 488 nm, 496 nm, 514 nm.
Van desde el azul clarito hasta el amarillo. Fluorocromos como CFP hasta Yellow
Láser de HeNe con una frecuencia de 543 nm. (Es de baja potencia)
Básicamente es verde. Fluorocromos como Rodamina, Alexas 543, 555, 594
Láser de HeNe con una frecuencia de 633 nm. (Es de baja potencia)
Rojo lejano. Fluorocromos como Topro, Topro 3, empleados como marcadores de DNA.
Estos fluorocromos son orientativos, es mejor ver en páginas especializadas sus
características exactas y sus aplicaciones.
Objetivos que poseemos actualmente:
Objetivo 10x seco se puede utilizar para campo claro, contraste de fases y contraste de
polarización, no está disponible para DIC.
Objetivo 40x de aceite
Objetivo 63x de aceite
Objetivo 100x de aceite.
En ellos se pueden utilizar para DIC y microscopia confocal, para UV se recomiendan sólo
utilizar el 40x y 63x ya que poseen sus lentes correctoras, el de 100x se ve pero no posee
lente correctora de UV.
Poseemos lámpara de fluorescencia con filtros Ultravioleta verde y azul, pero
principalmente su uso son como buscadores para después utilizar el confocal.
Los filtros poseen estas longitudes de onda:
Filtro A: UV
BP 340-380 para visualizar de 400 a 425 por encima no deja pasar nada
Filtro I3: Verde BP 450-490 para visualizar de 510 a 515 por encima no deja pasar nada
Filtro N21 Rojo BP 515-560 para visualizar de 580 a 590 por encima no deja pasar nada
No poseemos cámara fotográfica para fluorescencia.
Los cubres a emplear para que la eficacia de la observación sea máxima son cubres de 1 ½
ó 0'17 mm.
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