Tabla de contenido
7. Tejido afectado por formalina durante el aclarado o la infiltración con parafina
Este problema puede ocurrir cuando una válvula de escape permite el flujo de la formalina al baño de parafina.
Si observa este problema, póngase en contacto con el servicio de atención al cliente y solicite que se revise su
instrumento.
La contaminación por formalina se caracteriza por un tono azulado de los núcleos, una pérdida de los detalles de
la cromatina, la contracción del núcleo, una eosinofilia variable y la inflamación o contracción del citoplasma.
Primero derrita los bloques, retire la parafina sobrante y luego coloque las muestras en casetes nuevos. Esto
minimiza la contaminación por parafina de los reactivos del procesado. A continuación, someta los bloques al
proceso inverso de cualquiera de los métodos para el problema 6. Una vez concluido, sumérjalos en una solución
de recuperación Tris-HCI con pH alto (por ejemplo, BOND Epitope Retrieval Solution 2) entre 2 y 12 horas a
temperatura ambiente.
Este tratamiento mejora las cualidades de tinción de la H&E (hematoxilina y eosina), las cualidades de corte del
tejido y la cohesión de la sección. Es poco probable que los detalles del núcleo y la inflamación y definición del
citoplasma mejoren.
8. Tejido poco procesado fijado incorrectamente
Un posible remedio es procesar lentamente el tejido de forma inversa (ver C. Proceso de inversión lenta), aplicar
una fijación de formalina adicional y luego repetir el procesado mediante un programa adecuado al tamaño
y a la naturaleza de la muestra (ver Tipo de muestra y duración del protocolo en la página 161).
El tejido sin fijar o con una mala fijación se daña durante el procesado. El alcohol y las altas temperaturas ejercen
un efecto de fijación diferente al del formaldehído. Como resultado, los bloques son más susceptibles de
endurecerse y contraerse. Si además están poco procesados, pueden ser inutilizables.
Protocolo de limpieza inversa rápida
Paso Tipo de reactivo
1
Disolvente limpiador
2
Etanol limpiador
Tiempo de procesado:
Protocolo de limpieza inversa lenta
Paso Tipo de reactivo
1
Disolvente limpiador
2
Disolvente limpiador
3
Etanol limpiador
4
Etanol limpiador
Tiempo de procesado:
HistoCore PELORIS 3 Manual del usuario Rev A05
Tiempo (min) Temp. (°C) P/V
12
6
18
Tiempo (min) Temp. (°C) P/V
60
60
60
60
240
© Leica Biosystems Melbourne 2019
65
Ambiente
55
Ambiente
65
Ambiente
65
Ambiente
45
Ambiente
45
Ambiente
Localización y solución de problemas
Agitador
Tiempo de goteo (s)
Alta
Alta
Agitador
Tiempo de goteo (s)
Alta
Alta
Alta
Alta
10
10
10
10
10
10
188
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